期刊简介
本刊系卫生部主管、中华预防医学会、解放军第175医院共同主办、175医院承办的国家一类学术期刊。本刊一直坚持“理论与实践相结合、普及与提高相结合、中医与西医相结合”的办刊宗旨，主要栏目内容丰富，适合于高、中、初级科医生与外科医生阅读。
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首页>中国骨与关节损伤杂志
- 杂志名称：中国骨与关节损伤杂志
- 主管单位：骨与关节损伤杂志
- 主办单位：中华人民共和国卫生部
- 国际刊号：11-5265/R
- 国内刊号：11-5265/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：福建省科技期刊质量评比优秀奖（99）期刊收录：国家图书馆馆藏, 知网收录(中), 上海图书馆馆藏, 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 万方收录(中), 维普收录(中)
人骨形成蛋白7基因重组35型腺病毒载体的构建与鉴定
康焱；廖威明；袁振华；张珑涓；原向伟；雷磊
关键词：骨形成蛋白, 腺病毒, 基因, 治疗
摘要：目的 探讨构建携带人骨形成蛋白7(human bone morphogenetic protein-7,hBMP-7)基因的重组35型腺病毒(serotype 35 adenovirus,Ad5F35)载体,为基因治疗研究提供一种新的方法,并观察其在兔骨髓间充质干细胞(MSCs)中的表达.方法 以peDNA 1.1/Amp-hBMP7质粒为模板扩增骨形成蛋白(BMP-7)基因(1.3 kb),将回收的PCR产物片段克隆入pDC316载体,获得重组质粒pDC316-hBMP7.骨架质粒pBHG-fiberS/35和穿梭质粒pDC316-b.BMP7共转染293细胞,同源重组产生重组腺病毒rAd5/F35-hBMP7.同样的方法构建rAd5/F35-EGFP.在体外用不同感染复数(M·O·I)值的rAd5/F35-hBMP7和rAd5/F35-GFP分别转染兔MSCs,并留置空白对照.采用流式细胞仪、RT-PCR方法检测目的 基因的转染效率和表达.结果 PCR、酶切鉴定以及序列测定与比对分析表明,重组腺病毒rAd5/F35-hBMP7质粒构建正确.转染兔MSCs的高效率可达99%,hBMP-7基因存在于转染后的MSCs中并表达相应的mRNA.结论 本实验成功构建了含hBMP-7基因的重组腺病毒rAd5/F35-hBMP7载体,在体外能高效转染兔MSCs.
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